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elisa測抗原實驗報告范文(通用7篇)
在人們素養不斷提高的今天,報告使用的次數愈發增長,報告具有雙向溝通性的特點。一起來參考報告是怎么寫的吧,下面是小編收集整理的elisa測抗原實驗報告范文,歡迎大家借鑒與參考,希望對大家有所幫助。
elisa測抗原實驗報告 1
實驗目的:利用 ELISA 技術檢測樣本中是否存在特定病毒抗原,以輔助疾病診斷。
實驗材料:待檢樣本、病毒抗原特異性抗體、酶標二抗、底物顯色液、ELISA 試劑盒配套試劑與耗材。
實驗步驟:首先對 ELISA 板進行包被,將捕獲抗體固定在板孔表面;然后加入待檢樣本,孵育使抗原與抗體結合;洗滌后加入酶標二抗,再次孵育并洗滌;最后加入底物顯色液,根據顏色變化判斷結果。
實驗結果:部分樣本孔出現明顯顯色反應,通過與標準品對比,初步判斷這些樣本中存在目標病毒抗原。
實驗分析與結論:本次實驗操作過程規范,但在樣本處理環節可能存在個別樣本交叉污染情況。結果表明 ELISA 技術能夠有效檢測出樣本中的病毒抗原,為疾病診斷提供了有力依據,但需進一步優化實驗流程以減少誤差。
elisa測抗原實驗報告 2
實驗目的:運用 ELISA 方法檢測食品中是否含有常見過敏原抗原,保障食品安全。
實驗材料:各類食品樣本、過敏原特異性抗體、酶結合物、終止液等。
實驗步驟:依次進行包被、封閉、加樣、孵育、洗滌、加酶標二抗、孵育洗滌、加底物顯色及終止反應等步驟。
實驗結果:在幾種堅果類食品樣本中檢測到了相應的.過敏原抗原,而其他食品樣本未出現陽性反應。
實驗分析與結論:實驗中嚴格控制了溫度和時間等條件,但在洗滌步驟中可能存在洗滌不徹底的問題。結果說明 ELISA 可用于食品過敏原檢測,對于預防食物過敏事件具有重要意義,后續需改進洗滌操作以提高檢測準確性。
elisa測抗原實驗報告 3
實驗目的:采用 ELISA 技術檢測植物組織樣本中是否存在特定病原菌抗原,為植物病害防治提供依據。
實驗材料:患病植物組織提取液、病原菌特異性抗體、羊抗兔 IgG-HRP 等。
實驗步驟:ELISA 板包被抗體后,加入植物組織提取液,后續按常規 ELISA 流程進行操作。
實驗結果:在表現出明顯病害癥狀的植物樣本中檢測到了病原菌抗原,健康植物樣本為陰性。
實驗分析與結論:實驗過程中樣本提取可能存在雜質殘留影響結果。ELISA 可用于快速檢測植物病原菌抗原,對于及時發現和防治植物病害具有重要價值,后續實驗需優化樣本提取方法。
elisa測抗原實驗報告 4
實驗目的:利用 ELISA 檢測動物血清樣本中特定疫病抗原,輔助動物疫病診斷與防控。
實驗材料:動物血清、疫病抗原特異性抗體、TMB 底物溶液等。
實驗步驟:標準的 ELISA 操作流程,包括包被、加樣、孵育、洗滌、加酶標抗體、顯色等。
實驗結果:部分養殖場送檢的動物血清樣本呈現陽性反應,表明這些動物可能感染了目標疫病。
實驗分析與結論:實驗中存在不同批次試劑可能導致的`誤差。結果顯示 ELISA 在動物疫病抗原檢測方面具有良好的應用前景,但需對試劑質量進行更嚴格把控,以提高檢測的可靠性。
elisa測抗原實驗報告 5
實驗目的:通過 ELISA 技術測定生物制品中目標抗原的'含量,確保產品質量。
實驗材料:生物制品樣本、已知濃度的抗原標準品、抗該抗原的單克隆抗體等。
實驗步驟:先制作標準曲線,然后對生物制品樣本進行稀釋后加樣,按照 ELISA 常規步驟操作。
實驗結果:根據標準曲線計算出生物制品樣本中抗原的含量,與產品質量標準對比,判斷是否符合要求。
實驗分析與結論:實驗過程中樣本稀釋倍數的準確性對結果影響較大。結果表明 ELISA 可用于生物制品抗原含量測定,為產品質量控制提供了有效手段,后續需更精確地控制樣本稀釋過程。
elisa測抗原實驗報告 6
一.實驗目的
酶聯免疫吸附測定(enzyme-linked immunosorbent assay 簡稱ELISA)是在免疫酶技術(immunoenzymatic techniques)的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術,ELISA過程包括抗原(抗體)吸附在固相載體上稱為包被,加待測抗體(抗原), 再加相應酶標記抗體(抗原),生成抗原(抗體)--待測抗體(抗原)--酶標記抗體的復合物,再與該酶的底物反應生成有色產物。借助分光光度計的光吸收計算抗體(抗原)的量。待測抗體(抗原)的定量與有色產生成正比。
二.實驗原理
用于免疫酶技術的酶有很多,如過氧化物酶,堿性磷酸酯酶,β-D-半乳糖苷酶,葡萄糖氧化酶,碳酸酐酶,乙酰膽堿酯酶,6-磷酸葡萄糖脫氧酶等。常用于ELISA法的酶有辣根過氧化物酶,堿性磷酸酯酶等,其中尤以辣根過氧化物酶為多。由于酶摧化的是氧化還原反應,在呈色后須立刻測定,否則空氣中的氧化作用使顏色加深,無法準確地定量。
辣根過氧化物酶(HRP)是一種糖蛋白,每個分子含有一個氯化血紅素(protonhemin)區作輔基。酶的濃度和純度常以輔基的含量表示。氯化血紅素輔基的最大吸收峰是403nm,HRP酶蛋白的最大吸收峰是275nm,所以酶的濃度和純度計算式是(已知HRP的A(1cm 403nm 1%)=25,式中1%指HRP百分濃度為100ml含酶蛋白1g,即10mg/ml,所以,酶濃度以 mg/ml 計算是HRP的A(1cm 403nm mg/ml=2.5)HRP純度(RZ)=A403nm/A275nm純度RZ(Reinheit Zahl)值越大說明酶內所含雜質越少。高純度HRP的RZ值在3.0左右,最高可達3.4。用于ELISA檢測的HRP的RZ值要求在3.0以上。
ELISA的基本原理有三條:
(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;
(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;
(3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
基本方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O·D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
基本方法二 用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 ↓
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照) ↓
于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 ↓
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
(二) 酶與底物
酶結合物是酶與抗體或抗原, 半抗原在交聯劑作用下聯結的'產物。是ELISA成敗的關鍵試劑,它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應,還具有酶促反應,顯示出生物放大作用,但不同的酶選用不同的底物。
免疫技術常用的酶及其底物
* 終止劑為2mol/L H2SO4
** 終止劑為2 mol/L檸檬酸, 不同的底物有不同的終止劑。
可催化下列反應: HRP+H2O2→復合物 復合物+AH2→過氧化物酶+H2O+A AH2 ——為無色底物, 供氫體; A—— 為有色產物。
(三) ELISA常用的四種方法
1.直接法測定抗原 將抗原吸附在載體表面;
加酶標抗體,形成抗原—抗體復合物; 加底物。底物的降解量=抗原量。
2.間接法測定抗體
將抗原吸附于固相載體表面; 加抗體, 形成抗原-抗體復合物; 加酶標抗體;
加底物。 測定底物的降解量=抗體量。
3.雙抗體夾心法測定抗原
將抗原免疫第一種動物獲得的抗體吸附于固相表面;加抗原,形成抗原-抗體復合物;
加抗原免疫第二種動物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復合物;加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體); 加底物。底物的降解量=抗原量。
4. 競爭法測定抗原
將抗體吸附在固相載體表面;
(1) 加入酶標抗原;
(2),(3)加入酶標抗原和待測抗原;
加底物。對照孔與樣品孔底物降解量的差=未知抗原量。
elisa測抗原實驗報告 7
入校新生;谷丙轉氨酶(GPT);乙肝表面抗原(HBsAg)
肝功能檢查是診斷肝炎的主要指標,國內獻血員篩選仍以乙肝表面抗原(HBsAg)的檢測為依據[1]。HBsAg是HBV感染的特異性指標。大學生多集體生活,易造成肝炎的流行。每年對入校新生的肝功能檢查和HBsAg的檢測是很必要的,為此,我們對入校新生集體組織抽血檢查,現將2003年、2004年入校新生檢測結果報告如下。
1一般資料
11對象
研究對象是2003年全部入校新生3698人,其中男生1420人,女生2278人。2004年全部入校新生4377人,男生1805人,女生2572人。年齡18~22歲,所有的標本為空腹靜脈血,并于24h內分離血清。
12儀器與方法
用反向被動血凝試驗測定HBsAg,谷丙轉氨酶(GPT)用賴氏法測定[2]。使用上海榮盛生物技術公司生產的谷丙轉氨酶試劑盒,用廈門分析儀器廠生產的721分光光度計比色,通過標準曲線計算出谷丙轉氨酶的單位。
2結果
檢測結果見表1,表2。由表1,表2可以看出,我校2003年入校新生中HBsAg攜帶者31人,其攜帶率為084%(31/3698),其中女生13人,攜帶率057%(13/2278),男生18人,攜帶率127%(18/1420);GPT>80U/L3人,異常率為008%由表1,表2還可看出無論是2003年新生還是2004年新生,男生HBsAg攜帶率遠遠高于女生。表12003年入校新生HBsAg攜帶率及GPT異常率的檢測結果(略)表22004年入校新生HBsAg攜帶率及GPT異常率的檢測結果(略)
3討論
資料顯示,我校新生HBsAg攜帶率2003年為084%,2004年為067%,遠遠低于我省HBsAg攜帶率(我省HBsAg攜帶率一般在7%左右)。男生的HBsAg攜帶率高于女生的原因,我們認為可能與生活方式有關,如男生喜歡幾個人聚在一起吃飯、喝酒,而女生卻很少有這種愛好,所以肝炎在男生中傳播的機率就大一點。雖然我校學生HBsAg攜帶率偏低,但是也不能忽視,我國是乙型肝炎病毒(HBV)感染高發區,大約有98%的人攜帶乙肝病毒,每年有30萬人死于與乙肝有關的肝癌及肝硬化。因此,對正常的學生做好乙肝疫苗的接種,杜絕乙肝的傳播是很重要的。有報道820例幼兒接種乙肝疫苗后產生的免疫應答率為99268%,接種效果高于國內9677%的.報道[3]。對于HBsAg攜帶者和GPT增高者,做好早發現、早治療。病毒性肝炎已成為威脅人們健康的嚴重疾病,做好乙肝疫苗的接種,對學生進行乙肝知識的培訓,讓他們了解乙肝的傳播途徑和預防措施,養成良好的生活習慣,加強自我保護意識。
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